长时间的仿生栽培和(hé)生态研(yán)究,使得羊肚菌的(de)发生规(guī)律和生理需求逐渐为人们所掌(zhǎng)握。一(yī)些羊肚菌爱好者和科技工作者(zhě)开始意识到菌种在羊肚菌驯化栽(zāi)培中的重要性。这是从(cóng)仿生(shēng)栽培(péi)向人工(gōng)栽培(péi)的重要转(zhuǎn)变。
菌种的驯化选(xuǎn)育、补料技术和人为刺(cì)激诱(yòu)发(fā)出菇是羊肚(dù)菌人工(gōng)栽培区别于(yú)仿(fǎng)生(shēng)栽培的重(chóng)要标志。
实(shí)际上,20世纪80年代(dài),美(měi)国科学家Ower就模拟(nǐ)自然环境在实验室内成功实(shí)现(xiàn)了羊肚(dù)菌出菇[33~36],随后(hòu)由其合作者Mills进行了相对(duì)成功的工(gōng)厂化栽培应用(yòng)[4]。
无论是民间还(hái)是(shì)官方资料都显示,我国的羊(yáng)肚菌人工栽培(péi)技(jì)术(shù)都明显晚于Ower的技术专(zhuān)利。
蔡知桂等(děng)在2010年公布了一种羊肚菌栽培技术专利[37],技术流(liú)程(chéng)依(yī)次为(wéi)栽培种的制作、培养料的制备、播种、发(fā)菌管理(lǐ)及出菇管理等。值得注意的(de)是,该(gāi)专(zhuān)利(lì)要求(qiú)在菌丝成熟之前至少进行一次(cì)营养液补充,这可以认(rèn)为是羊肚菌(jun1)仿生栽培(péi)向纯人工栽培(péi)的过渡。赵(zhào)琪(qí)等公布了一种梯棱羊肚菌栽培方案和菌种制(zhì)作(zuò)方案(àn)的专利技术(shù),首次提及(jí)所用的菌(jun1)种是(shì)经过分子(zǐ)鉴定的梯(tī)棱羊肚菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌种(zhǒng)的选择
羊(yáng)肚菌子囊(náng)果具(jù)有明显(xiǎn)的形态可(kě)塑性(xìng),因此其物(wù)种的鉴定一直(zhí)是一个难(nán)题。早期对
羊(yáng)肚菌菌种的选(xuǎn)择和确定大多根据(jù)形态特征,保留(liú)下来的模式标(biāo)本和数据资料有限,因此,很难推定(dìng)早期资料中的所用品种和现代分类系统的对(duì)应关(guān)系。近(jìn)年来,应用分子系统发育学鉴(jiàn)定(dìng)羊肚菌物种得(dé)到广泛(fàn)的认可[40~43]。王波和(hé)鲜灵对(duì)四川(chuān)大邑(yì)县、崇州市、郫县和(hé)涪城区(qū)的(de)人工栽培品(pǐn)种(zhǒng)进行(háng)形态特征的(de)详细描述和分子鉴定(dìng),结果发现,所有羊肚菌品种的ITS-DNA序列与数据库中梯棱羊肚菌相似度达(dá)100%,而与(yǔ)羊肚菌(jun1)属的其他物种相(xiàng)差甚远[44]。赵琪等在公开的羊肚菌栽培专利中指出,所用的品种为梯棱羊肚(dù)菌[38,39]。
自2012年起(qǐ),我们在全国各地进行羊肚菌(jun1)的驯化栽培和标本采集整理工作,随后对来(lái)源清晰的4个商业推广菌株羊肚菌(jun1)1号、3号、6号(hào)和7号进行(háng)了详细的形态特(tè)征记录和DNA序列分子鉴定分析。结(jié)果表明,羊肚菌1号(hào)和3号是梯棱(léng)羊肚菌,6号为(wéi)六妹羊肚(dù)菌(jun1)(M.
sextelata),7号为七妹羊肚菌(M.septimelata),均属于黑色羊肚菌支系[43]。其他(tā)品种是否可用于驯化栽(zāi)培(péi)有(yǒu)待进行深入研究(jiū),建议生产者在(zài)开(kāi)展羊肚菌人工(gōng)栽培时,应定向采集当(dāng)前已经应用的品种(zhǒng),经初(chū)筛(shāi)、小试和中(zhōng)试后,再进行大(dà)面积(jī)的(de)示范(fàn)性栽培和推(tuī)广。
2.2 补料技术
在(zài)有目的有意识驯化菌种的基础上(shàng),“外源营养袋(dài)”的出现和广泛使用促(cù)进(jìn)了羊肚菌产(chǎn)业(yè)的(de)健康发(fā)展,外源营养袋技(jì)术是羊肚菌生产环(huán)节中(zhōng)的最重要技术处理,是羊肚菌丰(fēng)产的最重(chóng)要“能量”支撑。
Ower曾详细论述外(wài)源营养袋的技(jì)术原理和制作工艺,但(dàn)在随后的推(tuī)广应用中,并未(wèi)被(bèi)重视和使用(注:Ower于1986年逝(shì)世,后期(qī)的(de)推广由合(hé)作者Mills进行)。Ower对其原理和适用方法的解释是(shì)羊肚菌需(xū)要在营养相对贫乏的环境中才能进(jìn)行(háng)有性生殖,而其菌丝(sī)自身(shēn)储备的能量不足以(yǐ)支撑(chēng)其有性生殖过程,因(yīn)此需要从外界(jiè)吸收新的营(yíng)养(yǎng)物质,同时需要在生产后期(qī)对(duì)新(xīn)的营(yíng)养物质予(yǔ)以移除,以使(shǐ)菌丝重新回到营养贫乏状态转(zhuǎn)而进行有(yǒu)性生殖。Ower利用培养菌(jun1)核的培养料作为“外源性(xìng)营养(yǎng)物”进行补料操作[34~36]。
我国谭方河先生最(zuì)早使用外源营养(yǎng)袋技术[4]。约2000年前后,出(chū)于(yú)“不同菌丝的配合”(不同“极性”的菌丝杂合)可能有(yǒu)助于出菇的认识,在菌丝萌发后,他采取在菌床上扣上接种有(yǒu)另一类型羊肚菌菌种(zhǒng)的菌袋,以(yǐ)实(shí)现两种菌丝的融合,诱发(fā)出菇(gū),此(cǐ)方法比不(bú)“杂交(jiāo)”具有明显(xiǎn)的增产效果(guǒ),该技术在早期曾被称为“菌丝融合技术”。随(suí)后,谭方(fāng)河先(xiān)生又发现(xiàn),只(zhī)扣料(liào)袋(不(bú)接种)同样可以促进增(zēng)产,因此就(jiù)推(tuī)翻了“菌丝融(róng)合的(de)说(shuō)法”,进(jìn)而发展成为(wéi)现(xiàn)今的(de)外源营养袋技术。
2.3 保育催菇
催(cuī)菇是羊肚菌栽培的重要环节,技术性较强,其目的是创造不利于羊肚菌继续营养生长的条件,使其转向生殖(zhí)生长,其中包括营(yíng)养、水分、湿度、温度、光(guāng)线等刺激。
①营养刺激是指通过移除营养实现(xiàn)营养刺(cì)激,该技术(shù)也是(shì)Ower专利中(zhōng)强调的环(huán)节,可行的(de)操作是,外源营养袋施放(fàng)后20~25天移(yí)除外源营养袋[34~36]。
②水分(fèn)刺激是自然界大型真菌(jun1)出菇的重(chóng)要条件。水分可冲刷(shuā)真(zhēn)菌分(fèn)泌的各(gè)种酶类物质,改变菌丝渗透压,也是菌丝转向生殖生(shēng)长(zhǎng)所需要湿润环境的重要保证(zhèng)。具体做法(fǎ)是:撤袋之后,大(dà)水浇灌,至地面完全湿(shī)透[1]。
③湿度(dù)控制包括(kuò)土壤含水量和空气(qì)相对湿(shī)度,水分(fèn)刺激使土壤含水量达到饱和,随(suí)后控(kòng)制土壤水(shuǐ)分在(zài)20%~30%,原基发生前空(kōng)气湿(shī)度在85%~95% [1]。
④目前没有数据(jù)直接支持温差刺激(jī)实现羊(yáng)肚(dù)菌的生殖生长,但大量数(shù)据表明,10 ℃左右的昼夜温差,有助于羊肚(dù)菌出菇。主(zhǔ)要通过白(bái)天闭棚增温,晚间掀开棚通风降温以加大温差[1]。
⑤栽(zāi)培经验表明,光线也是(shì)影响出菇的一个重(chóng)要指(zhǐ)标(biāo),过(guò)强会抑制出菇(gū),可行的操作是使(shǐ)用4~6针(zhēn)的遮阳网进行遮阴(yīn)处理。